Avaliação de diferentes condições da albumina sérica bovina como agente capacitante de espermatozoides derivados de cutia-vermelha (Dasyprocta leporina, Linnaeus, 1758)
Ana Lívia Rocha Rodrigues
UFERSA
Lhara Ricarliany Medeiros de Oliveira
Antônia Beatriz Mendonça Pereira
Alexandre Rodrigues Silva
Alexsandra Fernandes Pereira
Palavras-chave: Roedor silvestre; Fertilização in vitro; Suplementação proteica
Resumo
A cutia-vermelha é um roedor silvestre de importância ecológica, econômica e científica. Neste sentido, é essencial o desenvolvimento de protocolos que otimizem sua capacidade reprodutiva, como o estabelecimento da capacitação espermática para a fertilização in vitro (FIV). Portanto, o objetivo foi avaliar diferentes concentrações de albumina sérica bovina (BSA) com a presença de cloreto de cálcio (CaCl2) como agentes capacitantes de espermatozoides epididimários de cutia-vermelha. Todos os procedimentos foram aprovados pelo CEUA/UFERSA (no. 20/2022) e ICMBio (no. 71837-1). Para tanto, seis animais adultos foram anestesiados e eutanasiados para o experimento. A recuperação dos espermatozoides foi realizada por lavagem retrógrada da cauda do epidídimo, seguida da capacitação espermática em meio mínimo capacitante (MMC) composto de 105 mM cloreto de sódio, 26 mM bicarbonato de sódio, 10 µg/mL vermelho de fenol, 5,56 mM glicose, 25 mM HEPES, 21,6 mM lactato de sódio, 2 mM cloreto de cálcio, 0,25 mM piruvato de sódio, e 1% solução de antibiótico-antimicótico. Três grupos foram considerados para comparação: GC (sem BSA e CaCl2), ↓BSACa (4 mg/mL BSA e 2 mM CaCl2) e ↑BSACa (15 mg/mL BSA e 2 mM CaCl2). Após 6 h de incubação (38,5 °C em 6,5% de CO2), os espermatozoides foram avaliados quanto à motilidade, morfologia, integridade funcional da membrana plasmática, capacitação propriamente dita e reação acrossômica. Todos os dados foram analisados para normalidade pelo teste de Shapiro-Wilk e a homogeneidade da variância pelo teste de Bartlett e, posteriormente, transformados e analisados usando o teste de Tukey (P < 0,05). Quanto à obtenção das amostras, essas apresentaram coloração esbranquiçada, com média de pH 7,0 e índice de vigor de 4,5 (escala de 0 a 5). A concentração média foi de 252,3 × 106 espermatozoides/mL, variando de 179 a 290 × 106 espermatozoides/mL. Nenhuma diferença foi observada entre os grupos experimentais para a integridade da membrana plasmática, motilidade, amplitude do descolamento lateral da cabeça (ALH), frequência de batimento regular (BCF) e retilinearidade (STR, P > 0,05). Contudo, os grupos ↓BSACa e ↑BSACa apresentaram resultados positivos nos demais parâmetros associados à motilidade espermática em comparação ao GC (P < 0,05). Adicionalmente, a normalidade da morfologia espermática foi superior nos grupos GC (91,3% ± 1,7) e ↓BSACa (89,3% ± 0,8) em relação ao ↑BSACa (80,3% ± 4,5; P < 0,05). Em contrapartida, apenas o grupo ↓BSACa (P < 0,05) foi capaz de apresentar taxas acima de 90% de capacitação espermática (GC: 63,5% ± 1,0; ↓BSACa: 90,7% ± 1,6; ↑BSACa: 68,8% ± 1,6) e reação acrossômica (GC: 54,7% ± 1,5; ↓BSACa: 93,8% ± 1,6; ↑BSACa: 66,0% ± 2,7). Portanto, destaca-se que a capacitação espermática por 6 h utilizando uma menor concentração de BSA associada ao cloreto de cálcio (↓BSACa; 4 mg/mL BSA e 2 mM CaCl2) no meio de incubação foi a mais eficiente para espermatozoides epididimários de cutia-vermelha. Esses achados indicam que uma modulação mais equilibrada da concentração de BSA e cálcio é capaz de potencializar a funcionalidade espermática na espécie, possibilitando o aprimoramento das biotécnicas reprodutivas para fins de conservação dos roedores silvestres.