Identificação de marcadores de DNA ISSR polimórficos em genitores de população de mapeamento genético em meloeiro
Ruanna Fabbia Ferreira Gomes
Ufersa
Willianny Karem de Sousa
Glauber Henrique de Sousa Nunes
Ioná Santos Araújo Holanda
Palavras-chave: melhoramento genético, viabilidade agroeconômica
Resumo
O melão (Cucumis melo L.) é uma das principais frutas produzidas no Brasil, com destaque para o Nordeste, especialmente o Rio Grande do Norte responsável por grande parte da produção nacional e exportação desse fruto. A importância do agronegócio do meloeiro está agregado ao seu impacto social e econômico gerado, entretanto, doenças radiculares, como a podridão do colo e o declínio das ramas causados por Macrophomina phaseolina, comprometem a sustentabilidade da cultura. Nesse contexto, o melhoramento genético visando resistência é estratégico, mas enfrenta limitações devido às interações genótipo × ambiente. Assim, o uso de ferramentas biotecnológicas, como marcadores ISSR, torna-se fundamental para a caracterização genética, seleção de parentais resistentes e aplicação em populações de meloeiro. Este trabalho teve como objetivo selecionar marcadores ISSR com padrões de amplificação consistentes e potencial polimórfico entre genitores contrastantes, visando a futura aplicação em analises genomicas em uma população de meloeiro. Foram analisados folhas jovens dos individuos: híbrido (F1.1) e dois indivíduos contrastantes da população F2, oriundos do cruzamento entre o acesso de meloeiro C14 (resistente) e o híbrido comercial Goldex (suscetível). A extração de DNA ocorreu pelo método CTAB proposto por Doyle e Doyle (1987), com posterior visualização e quantificação do material genético obtido por eletroforese em gel de agarose a 1% a 120V corado com brometo de etídeo (10 mg/mL) e registro em fotodocumentador. O DNA dos individuos foram diluidos para concentração de 10 ng/μl, seguido da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) com 28 primers ISSR comerciais (Gbt oligo) durante 35 ciclos com MIX composto por 30 ng de DNA molde, 0,33 μM primer, 1x Taq-Buffer MgCl2, 0,16 mM dNTP, 1U/μl Taq DNA-polimerase, 0,208 mg/mL BSA e água-ultrapura q.s.p. As amplificações ocorreram no termociclador automatico e a separação dos fragmentos em gel de agarose a 3% e fotodocumentados sob a presença de luz UV. Todos os primers testados apresentaram amplificação, sendo que dez deles (UBC-808, UBC-823, UBC-826, UBC-836, UBC-842, UBC-847, UBC-850, UBC-856, UBC-857 e UBC-889) exibiram a presença de polimorfismo. Estes resultados viabilizarão estudos futuros voltados a análises genômicas e programas de melhoramento genético do meloeiro.