PDF
Publicado
07-01-2025
Seção
Núcleo 1: Ciências Agrárias, Ciências Biológicas e Ciências da Saúde:
Diâmetro de oócitos oriundos de folículos secundários caprinos cultivados in vitro na presença do extrato da fumaça de cigarro
Fernanda Vitória de Oliveira Nogueira
Maria Eduarda Alencar Borges
Victor Gabriel Freire de Gouveia
Isadora Pereira Bandeira
Gerlane Modesto da Silva
Palavras-chave: Array
Resumo
A fertilidade de mulheres fumantes é diretamente afetada, visto que influencia na ocorrência de câncer na cérvix e ovário, menopausa precoce e diminuição na fertilidade. Mesmo diante de estudos que atestem a agressividade dos componentes da fumaça de cigarro em relação ao sistema reprodutor feminino, ainda não se conhece exatamente o mecanismo que causa esses efeitos deletérios. Este estudo objetivou avaliar o impacto do extrato da fumaça de cigarro (EFC) no diâmetro de oócitos de folículos secundários cultivados na presença do EFC. Ovários foram coletados em abatedouro local e a sua utilização está de acordo com a Legislação Brasileira para cuidado e uso de animais em atividades de pesquisa científica. O preparo do EFC seguiu o protocolo proposto por Gellner (Gellner et al., Current Protocols in Neuroscience, 77:9.54.1-9.54.10, 2016). O meio de base foi o α-MEM suplementado com ITS, piruvato, glutamina, hipoxantina, de albumina sérica bovina e ácido ascórbico, sendo denominado α-MEM+. Folículos secundários (± 200 µm) (n=24) foram obtidos de ovários de cabras adultas e cíclicas, através da microdissecção. Os folículos foram cultivados individualmente na ausência (α-MEM+; n=8) ou presença de EFC em concentrações de 2,5% (n=8) e 5% (n=8). Foram utilizadas gotas de 100 µl de meio, em placas de petri, sob óleo mineral, sendo a troca de 60µl realizada a cada 2 dias. O cultivo foi realizado por 7 dias em uma incubadora a 39ºC e 5% de CO. Fotografias dos óocitos foram obtidas nos dias 0 e 7 de cultivo, utilizando a HAYEAR USB Microscope Camera acoplada a estereomicroscópio para posterior análises. O diâmetro oócitário foi obtido pela média de duas medidas perpendiculares no programa AxioVision®. Os dados foram analisados utilizando o programa GraphPad Prism®. Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média (SEM) e submetidos à análise de variância (ANOVA), seguido de teste de Tukey, considerando-se significativo P<0,05. No D0 não houve diferença significativa no diâmetro oócitário entre os tratamentos avaliados (α-MEM+: 26,92 ± 0,70; 2,5%: 28,10 ± 0,84; 5,0%: 28,14 ± 0,54)(p>0,5). O mesmo comportamento foi observado quando os tratamentos foram comparados no D7 (α-MEM+: 70,48 ± 3,50; 2,5%: 74,52 ± 3,73; 5,0%: 78,91 ± 4,31)(p>0,5). Foram observados diâmetros oocitários significativamente superiores no D7 quando comparado ao D0 em todos os tratamentos avaliados (p<0,05). Pode-se concluir que a exposição ao extrato da fumaça de cigarro não afeta o crescimento dos oócitos em caprinos nas concentrações de 2,5% e 5% cultivadas durante 7 dias.