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Publicado
07-01-2025
Seção
Núcleo 1: Ciências Agrárias, Ciências Biológicas e Ciências da Saúde:
Morfologia de folículos secundários caprinos em diferentes concentrações do extrato da fumaça de cigarro
Isadora Pereira Bandeira
Gerlane Modesto da Silva
Fabrícia Barroso Rodrigues
Rebeca Paulina Duarte Queiroz
Maria Eduarda Alencar Borges
Palavras-chave: Array, Array, Array, Array
Resumo
A compreensão mais profunda sobre os mecanismos pelos quais a exposição aos compostos da fumaça de cigarro prejudica as células ovarianas, é importante para o desenvolvimento de estratégias de prevenção dos danos associados ao tabagismo. Este estudo teve como objetivo avaliar a morfologia e a formação de antro de folículos ovarianos secundários caprinos cultivados na presença de diferentes concentrações de extrato da fumaça de cigarro (EFC). Ovários foram coletados em abatedouro local e a sua utilização está de acordo com a Legislação Brasileira para cuidado e uso de animais em atividades de pesquisa científica. O preparo do EFC seguiu o protocolo proposto por GelLner (Gellner et al., Current Protocols in Neuroscience, 77:9.54.1-9.54.10, 2016). O meio de base foi o α-MEM suplementado com ITS, piruvato, glutamina, hipoxantina, albumina sérica bovina e ácido ascórbico, sendo denominado α-MEM+. Folículos secundários (± 200 µm) (n=24) foram obtidos de ovários de cabras adultas e cíclicas, através da microdissecção. Os folículos foram cultivados individualmente na ausência (α-MEM+; n=8) ou presença de EFC em concentrações de 2,5% (n=8) e 5% (n=8). Foram utilizadas gotas de 100 µl de meio, em placas de petri, sob óleo mineral, sendo a troca de 60µl realizada a cada 2 dias. O cultivo foi realizado por 7 dias em uma incubadora a 39ºC e 5% de CO. Fotografias dos folículos foram obtidas nos dias 0, 2, 4, 6 e 7 de cultivo, utilizando a HAYEAR USB Microscope Camera acoplada a estereomicroscópio para posterior análises. Foram considerados morfologicamente anormais os folículos que apresentaram oócito picnótico, extrusão oocitária ou desorganização das células da granulosa. O antro foi considerado quando houve o surgimento de uma cavidade repleta de líquido. Foram realizadas duas repetições. Os resultados a seguir são apenas descritivos, tendo em vista que ainda estão em andamento três repetições previstas para a análise estatística. As taxas de folículos morfologicamente normais após 7 dias de cultivo foram de 100% para os tratamentos α-MEM+ (16/16) e EFC 5% (15/15) e 87,5% para o grupo EFC 2,5% (14/16). A extrusão folicular foi o único parâmetro de anormalidade morfológica observada apenas no tratamento 2,5% (D2: 6,25% - 1/16; D4: 12,5% - 2/16). O aparecimento da cavidade antral se iniciou no D2 em todos os tratamentos ( α-MEM+: 6,25% - 1/16; EFC 2,5%: 18,75% - 3/16; EFC 5%: 13,33% - 2/15). No D7 a taxa de formação de antro foi de 50% (8/16), 43,75% (7/16) e 53,33% (8/15) para os tratamentos α-MEM+, EFC 2,5% e EFC 5%, respectivamente. Os dados preliminares levam à conclusão que não houve influência do EFC sobre a sobre a morfologia folicular e formação de antro de folículos secundários caprinos cultivados in vitro.