EVALUATION OF THE FLOCCULATION LIMIT TECNHNIQUE FOR QUALITY CONTROL OF CLOSTRIDIAL VACCINES

Resumen

Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar e padronizar o teste in vitro Limite de Floculação, para ser utilizado no controle de qualidade de vacinas contra enterotoxemia. Foram utilizadas vacinas experimentais contra enterotoxemia e toxóides produzidos pelo Clostridium perfringens tipo D, previamente avaliados por métodos in vivo, empregando-se os testes de soroneutralização em camundongo e TCP. A técnica Limite de Floculação consistiu em misturar volumes variados de antitoxina com volumes fixos de toxóide em tubos de ensaio. O primeiro tubo a flocular foi dito como sendo o que continha a quantidade mais próxima de antitoxina equivalente à quantidade de antígeno na amostra e se propôs que o Lf contido no tubo foi unidade de Lf da amostra testada. Os principais resultados obtidos indicaram que o nível mínimo de antitoxina detectável em soros de coelhos e carneiros pela técnica limite de floculação é 10 UI/mL. O coeficiente de correlação, obtido entre os títulos de toxóide pelos métodos TCP e Limite de floculação foi 99,97%. Conclui-se que o Limite de Floculação é satisfatório para substituir os tradicionais métodos in vivo utilizados na análise de toxóide epsilon. No entanto, a referida técnica é pouco eficiente para ser utilizada no teste de potência de vacinas contra enterotoxemia, em substituição à soroneutralização em camundongos. Palavras-Chave: Clostridioses, metodologias in vitro, teste de potência, análise de toxóide epsilon.